Anticorps monoclonaux de souris pour déceler les souches de sérotype
de Pseudomonas aeruginosa pour la sérotypie
et la détection de la bactériémie P. aeruginosa

ERFA offre l'ensemble le plus complet d'anticorps monoclonaux pour déceler 17 souches de sérotype O standard (IATS) de Pseudomonas aeruginosa (tableau 1).
Les anticorps sont très bien caractérisés en ce qui concerne la spécificité, les isotypes et la puissance (1, 2).

Ces anticorps constituent une banque de réactifs immunologiques inestimable pouvant avoir des applications dans la sérotypie, la cartographie de déterminants antigéniques, la détermination structurale des lipopolysaccharides et les études de protection contre le P. aeruginosa (3-5).

Un anticorps monoclonal spécifique à chaque sérogroupe a été choisi pour former une trousse d'anticorps. Il s'agit d'un test d'agglutination sur lame bactérienne dans lequel une petite quantité de bactéries prise à l'aide d'une anse à partir d'une culture en gélose peut être mélangée à une petite goutte (10 ul) de solution d'anticorps sur une lame de microscope. Une agglutination positive peut être observée facilement en moins de 10 secondes. Grâce à un tel test, les techniciens de n'importe quel laboratoire clinique seront en mesure d'effectuer le test, sans formation spéciale préalable. À ce jour, beaucoup d'ensembles de cette trousse ont été préparés et testés par de nombreux centres cliniques aux prises avec des infections au P. aeruginosa. Ces centres comprennent : l'Hôpital pour enfants de Colombie-Britannique à Vancouver, le Cystic Fibrosis Centre du States Hospital of Denmark à Copenhague, le groupe pédiatrique de l'Hôpital universitaire de l'Alberta à Edmonton, le Pseudomonas stock culture collection laboratory du Dr P.V. Liu de l'Université de Louisville, et l'Hôpital général de Montréal, division des maladies infectieuses. Jusqu'à maintenant, nous avons testé les anticorps sur plus de 600 isolats cliniques de P. aeruginosa, et les résultats ont démontré un bon accord sur toutes les souches typables avec le sérum de typage de pseudomonas Difco disponible dans le commerce. De plus, l'incidence de souches non typables et polytypables a été considérablement diminuée lorsque les anticorps monoclonaux étaient utilisés. Les réactions croisées menant à la polytypabilité et à la non typabilité sont des problèmes courants lorsque le sérum Difco est utilisé, et de telles réactions croisées ne sont pas observées avec la trousse d'anticorps monoclonaux. Quant aux fins diagnostiques, les anticorps ont été cultivés spécifiquement contre les lipopolysaccharides du P. aeruginosa, et peuvent donc être facilement mélangés en cocktail des 17 anticorps.

P. aeruginosa est un important pathogène bactérien d'infections nosocomiales (de source hospitalière) et peut également causer des maladies potentiellement mortelles chez les patients atteints de cancer, de plaies de brûlures, de fibrose kystique et chez les patients ayant reçu un traitement immunosuppresseur. Ainsi, la classification des isolats P. aeruginosa constitue une tâche routinière importante dans les hôpitaux. En ce moment, la méthode la plus couramment utilisée dans la plupart des hôpitaux est la sérotypie, et un ensemble d'antisérums de typage (anticorps polyclonaux de lapins) est disponible dans le commerce par les Laboratoires Difco. L'ensemble d'anticorps que nous avons produit est un candidat naturel au remplacement des sérums Difco qui ont la variabilité habituelle d'un lot à l'autre et les problèmes de réactions croisées mentionnés précédemment.

Un test d'agglutination sur lame pour l'identification rapide du Pseudomonas aeruginosa dans les cultures sanguines ou les échantillons respiratoires au moyen d'un mélange de ces 17 anticorps monoclonaux est maintenant disponible.

TABLEAU 1

Caractérisation des anticorps monoclonaux pour déceler
les souches de sérotypes de P. aeruginosa

^a La spécificité O représentait une réactivité positive au LPS du groupe O désigné en ELISA.

^b Le titre ELISA Log10 a été déterminé comme la dilution en 10 volets consécutifs la plus élevée du liquide ascitique donnant encore un DO405 de 0,1 en réaction avec 0,5 g de LPS. Le phosphatase alcalin et p-nitrophényl-phosphate a été le système de substrat d'enzyme utilisé.

ND Non déterminé